GENI COINVOLTI NELLA TRASMISSIONE DEI SEGNALI CAMP E RAS. MANIPOLAZIONE DELLA LORO ESPRESSIONE ED ATTIVIT`. TERAPIA GENICA SOMATICA

1. Isolamento di proteine AKAP specifiche di tessuto (tiroide, cuore, endotelio e colon) che legano PKA sul mitocondrio, Golgi e citoscheletro. Saranno costruiti mutanti dominanti negativi e positivi che inibiscono od attivano il circuito di segnalazione cAMP locale (mitocondrio, membrana citoplasmatica) e nucleare. 2. Sarà determinato il meccanismo molecolare della azione dei geni Ras sul potenziale redox. Specificamente, vogliamo determinare la localizzaione di Ki Ras e come quest'ultimo attiva la superossido dismutasi mitocondriale (CuSOD). Vogliamo inoltre sviluppare sistemi di inibizione specifica di H e K in vivo. 3. Sarà determinato il meccanismo molecolare della attivazione di Ras e Src da parte degli androgeni ed estrogeni. I vettori e reagenti sviluppati in (2) saranno utilizzati anche in sistemi estrogeno androgeno-dipendenti allo scopo di inibire solo l'effetto mitogenico indotto da estrogeni ed androgeni, lasciando intatto l''effetto differenziativo. 4. Sarà analizzato il meccanismo molecolare della attivazione da parte di cAMP-PKA di promotori contenti CAAT . Mutagenesi dei fattori NFYA, B e C per determinare i requisiti e la regolazione del complesso NFY/p300; B. Saranno isolati i geni che interagiscono con CREM (CREB modulator) e geni attivati da cAMP in fegato rigenerante. 5. Saranno sviluppati modelli in vivo per testare l'efficacia biologica dei reagenti sviluppati nei punti (1), (2) e (3). I sistemi che svilupperemo saranno: angioplastica carotidea; cuore perfuso; eccitosssicità nel SNC da iniezione locale di glutammato.