EFFETTI CITOTOSSICI DEL CADMIO SULLO SVILUPPO EMBRIONALE E SULL’ ESPRESSIONE DELLA GFAP IN Danio rerio

Il cadmio è un metallo pesante tossico, sempre più presente nell’ambiente. I pesci assorbono i metalli attraverso branchie ed intestino bioaccumulandolo anche a livello encefalico (Favorito et al., Chem. Ecol., 2011). Nel presente lavoro si è analizzata l’azione del cadmio sullo sviluppo embrionale di Danio rerio (zebrafish) e sull’espressione della proteina gliofibrillare acida (GFAP), marker d’elezione delle cellule gliali. Embrioni di zebrafish a 6 ore di sviluppo sono stati esposti a concentrazioni di 5, 10, 50, 100, 500 e 1000 μ M di CdCl2. A 24 e 48 ore di sviluppo si è proceduto all’analisi fenotipica e della mortalità rilevando dopo 24 ore una mortalità di oltre il 75% a 500 μM e totale a 1000 μM; a 5 e 10 μM non si sono osservati particolari fenomeni di mortalità, mentre a 50 μM si è avuto incremento della mortalità (32%) e riscontro, su una parte degli embrioni vivi, di evidenti alterazioni fenotipiche come: ipopigmentazione, alterazione del sacco vitellino, curvatura dell’asse corporeo, edema e ipoplasia della testa. A 100 μM la mortalità è stata pari al 54%. Alla luce di tali risultati, abbiamo quindi analizzato i possibili effetti citotossici del cadmio sull’ontogenesi della neuroglia solo sugli embrioni esposti a 5, 10, 50 e 100μM di CdCl2 determinando il livello di espressione della GFAP mediante immunofluorescenza indiretta in whole mount e l’impiego dell’anticorpo policlonale anti-GFAP alla diluizione di 1/300. Negli embrioni esposti a 50 e 100μM di CdCl2 si è riscontrato un significativo decremento già dopo 24h, nell’area del tectum e del romboencefalo, della immunoreattività alla GFAP rispetto all’immunoreattività rilevata negli embrioni di controllo. Tali risultati evidenziano l’azione tossica del cadmio sul normale sviluppo delle cellule gliali così come già da noi riportato negli adulti di zebrafish (Favorito et. al., Eur J Histochem vol55/sup.1, 2011).