Sviluppo di un sistema di microscopia time-lapse per lo studio della motilità cellulare in vitro

La chemiotassi, processo attraverso il quale una cellula è capace di percepire gradienti di segnali chimici e rispondere muovendosi in una specifica direzione, è un meccanismo di fondamentale importanza in numerosi fenomeni biologici. Il primo saggio quantitativo per lo studio della chemiotassi, sviluppato da Boyden, consta di un sistema dotato di due compartimenti separati da una membrana porosa attraverso la quale le cellule migrano seguendo un gradiente chemiotattico. L’applicazione quantitativa del saggio è limitata dalla difficile caratterizzazione del gradiente chemiotattico e dall’impossibilità di considerare gli eventi dinamici che sono alla base del fenomeno. L’obiettivo del presente lavoro è la messa a punto di un saggio di chemiotassi che superi i limiti delle tecniche attualmente in uso ed in particolare consenta l’osservazione dal vivo della migrazione cellulare tramite tecniche di video microscopia ottica. Tale saggio è basato sull’utilizzo di un gel di collagene come substrato per la migrazione cellulare.